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2022/5/19 浏览次数：

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　　液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20?m（5~10?m），取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
　　色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同：①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm（常用4.6mm，国内有4mm和5mm），柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore，又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径>5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。
　　常见的分配柱填料：碳十八柱
　　（ODS/C18）、碳八柱（MOS/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、碳四柱（Butyl/C4）、碳一柱（Methyl/C1）、阴离子交换柱（SAX）、阳离子交换柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、氰基柱（Cyano/CN/Nitrile）

液相色谱的不同柱

柱形	柱内径	流动相流速	样品容量
制备柱	4in（≈100mm）	960ml/min	2.5g
制备柱	2in（≈50mm）	240ml/min	600mg
制备柱	1in（≈25mm）	61ml/min	150mg
半制备柱	9mm	11ml/min	25mg
常规柱	4.6mm	0.5~2.0ml/min	0.2~7mg
细内径柱	2.1mm	0.2~0.5ml/min	0.05~0.2mg
微柱	0.8~1.0mm	25~60μl/min	50~500μg
毛细管柱	0.1~0.5mm	1~15μl/min	1~50μg
纳米柱	≤0.1mm	≤1μl/min	≤1μg

按照色谱模式分类的原理及应用范围

模式	固定相种类	分离原理	应用对象
反相	C18、C8、C4、C1、苯基	溶质疏水性不同导致其在流动相和固定相之间分配系数的差异	大多数有机物；多肽、蛋白质、核酸等生物大、小分子，样品一般溶于水中
正相	SiO2、CN、NH2	溶质极性不同导致其在极性固定相上吸附强度的差异	中、弱和非极性化合物，样品一般溶于有机物
离子交换	强阳、弱阳、强阴、弱阴	溶质电荷不同及其与离子交换固定相库伦作用力的差异	离子和可离解化合物
凝胶	凝胶渗透、凝胶过滤	溶质分子尺寸及形状不同使得其在多孔填料中滞留时间存在差异	可溶于有机溶剂或水的任何非交联型化合物
疏水	丁基、苯基、二醇基	溶质的弱疏水性及其对流动相盐浓度依赖性的差别	水溶性生物大分子
亲水（HILIC）	硅胶、聚乙二醇键合、两性离子固定相	多保留机制，包括分配机制、离子交换、偶极-偶极相互作用等	糖类、氨基酸、肽的分离；也应用于极性药物、代谢物
亲和	种类较多	溶质与固定相表面配基之间的弱相互作用所导致的分子识别现象	多肽、蛋白质、核酸、塘缀合物等生物分子及可与生物分子产生亲和相互作用的小分子
手性	手性色谱	手性化合物与配基间的手性识别作用	手型拆分

液相色谱法分类

按固定相形态分类		按作用原理分类		按物理特征分类
固定相	名称	原理	名称	特征	名称
液体固体	液-液色谱液-固色谱	分配	液-液分配色谱	平面固定相	平面色谱
		吸附	液-固分配色谱	纸固定相	纸色谱
		分子大小	体积排阻色谱	薄层固定相	薄层色谱
		离子交换能力	离子交换色谱	颗粒固定填充	填充色谱
		亲和力	亲和色谱	色谱柱中空	空心柱色谱
		电渗及电泳	毛细管电泳	采用高压流动相	高压液相色谱

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